Un nanoamplificatore a catena di ibridazione bloccata e segnale-lock per l'analisi rapida e altamente sensibile di Aβ42.

La proteina Amyloid-beta 42 (Aβ42) è un biomarcatore centrale associato alla malattia di Alzheimer (AD), ma la quantificazione accurata di Aβ42 a basse concentrazioni nel plasma risulta complessa a causa di interferenze di matrice, limitata sensibilità degli assay e procedure lunghe nelle tecniche convenzionali. Questo studio presenta lo sviluppo di una piattaforma biosensibile enzimaticamente indipendente che integra una sonda aptamerica tripla elica (THAP) con una reazione a catena di ibridazione bloccata (cHCR), denominata T-cHCR, per l'analisi sensibile di Aβ42. Nel sistema, il riconoscimento di Aβ42 induce il rilascio controllato di una sonda trigger dal modulo THAP triplex-lock, il quale avvia una cascata cHCR a due forcine per amplificare il segnale a basso rumore di fondo. In condizioni ottimizzate, il test T-cHCR ha mostrato una risposta lineare a concentrazioni di Aβ42 da 1 a 1000 pg/mL con un limite di rilevamento di 1.16 pg/mL, ovvero 8.1 volte inferiore al limite minimo riportato dal kit ELISA di riferimento. L'analisi preliminare su campioni plasmatici clinici ha evidenziato differenze significative nei livelli di Aβ42 tra pazienti AD e controlli sani, suggerendo un potenziale uso diagnostico. Il metodo si distingue per la rapidità, l'assenza di enzimi e la bassa interferenza di fondo. Tuttavia, sono necessari ulteriori studi di validazione su campioni più ampi per confermare l'efficacia clinica della piattaforma.